Post by janking on Jul 30, 2023 6:48:56 GMT -5
的 DNA 片段，并通过 Hieff Clone One Step Cloning Kit (YEASEN) 将其组装到带有 EGFP 片段的表达载体 pTol2 中。同样将mCherry-SULI、mCherry或Pitx2(上海Generay公司合成)片段插入pTol2中，以类胎质粒。对于在 HEK 293 T 细胞系中的表达，将编码mCherry-SULI和EGFP-Hsp104的DNA片段插入具有CMV启动子的pcDNA3.1载体中。所有质粒序列均通过桑格测序确认。SULI和SULI的蛋白质序列f
sources, NIH, Manassas, VA, USA) 和抗 β-肌动蛋白 (1:200; Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, USA) 单克隆抗体偶联过夜，β-肌动蛋白用作上样对照。然后，洗涤膜并与山羊抗小鼠 HRP 缀亚洲手机号码列表合的二抗 (1:5,000) (Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, USA) 孵育 1 小时，并使用增强化学发光 (ECL) 检测系统 (GE Healthcare, Buckinghamshire, UK) 检测特异性反应性。1% Tween 20 和 3% 牛
血清白蛋白，印迹与小鼠抗 RVFV N (R3-ID8;1:2,000) (BEIResources, NIH, Manassas, VA, USA) 和抗 β-肌动蛋白 ( 1:200；Santa Cruz Biotechnology，达拉斯，德克萨斯州，美国）单克隆抗体过夜，β-肌动蛋白用作上样对照。然后，清洗膜并用山羊抗小鼠 HRP 偶联二抗 (1:5,000) (Santa Cruz Biotechnology,
sources, NIH, Manassas, VA, USA) 和抗 β-肌动蛋白 (1:200; Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, USA) 单克隆抗体偶联过夜，β-肌动蛋白用作上样对照。然后，洗涤膜并与山羊抗小鼠 HRP 缀亚洲手机号码列表合的二抗 (1:5,000) (Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, USA) 孵育 1 小时，并使用增强化学发光 (ECL) 检测系统 (GE Healthcare, Buckinghamshire, UK) 检测特异性反应性。1% Tween 20 和 3% 牛
血清白蛋白，印迹与小鼠抗 RVFV N (R3-ID8;1:2,000) (BEIResources, NIH, Manassas, VA, USA) 和抗 β-肌动蛋白 ( 1:200；Santa Cruz Biotechnology，达拉斯，德克萨斯州，美国）单克隆抗体过夜，β-肌动蛋白用作上样对照。然后，清洗膜并用山羊抗小鼠 HRP 偶联二抗 (1:5,000) (Santa Cruz Biotechnology,